Kartičky na Techniky izolácie leukocytov z krvi

Techniky Izolácie Leukocytov z Krvi: Kompletný Prehľad

Zhrnutie Test znalostí Kartičky Podcast Myšlienková mapa

1 / 21

Aký je základný postup izolácie všetkých leukocytov osmotickou lýzou z 1 ml krvi (kroky 1–8)?

1) 1 ml krvi do 15 ml skúmavky; 2) pridať 2 ml destilovanej vody; 3) premiešať a inkubovať 35–40 s (osmotická lýza erytrocytov); 4) pridať 1 ml 2,7 %

Medzerník na otočenie · Šípky na navigáciu

Ťukni na otočenie · Potiahni na navigáciu

Izolácia leukocytov

21 kartičiek

Kartička 1

Otázka: Aký je základný postup izolácie všetkých leukocytov osmotickou lýzou z 1 ml krvi (kroky 1–8)?

Odpoveď: 1) 1 ml krvi do 15 ml skúmavky; 2) pridať 2 ml destilovanej vody; 3) premiešať a inkubovať 35–40 s (osmotická lýza erytrocytov); 4) pridať 1 ml 2,7 %

Kartička 2

Otázka: Prečo sa pri osmotickej lýze leukocytov pridáva destilovaná voda a následne 2,7 % NaCl?

Odpoveď: Destilovaná voda vytvorí hypotonické prostredie, ktoré spôsobí osmotickú lýzu erytrocytov; pridanie 2,7 % NaCl obnoví izotonické prostredie a zastaví

Kartička 3

Otázka: Ako sa stanovuje počet leukocytov pomocou Bürkerovej komôrky podľa postupu v texte?

Odpoveď: Zrieď 25 μl krvi v 475 μl Türkovho roztoku (1:20), zmiešaj s trypánovou modrou, kvapku prenes do počítacieho priestoru Bürkerovej komôrky a spočítaj b

Kartička 4

Otázka: Čo obsahuje Türkov roztok a na čo slúžia jeho zložky pri počítaní leukocytov?

Odpoveď: Obsahuje ľadovú kyselinu octovú, ktorá rozruší erytrocyty a trombocyty, a metylovú (genciánovú) violeť, ktorá farbí jadro leukocytov.

Kartička 5

Otázka: Ako sa určuje životnosť (vitalita) izolovaných leukocytov v tomto postupe?

Odpoveď: Pod mikroskopom spočítame mŕtve bunky – mŕtve bunky prijímajú farbivo (sú tmavšie). Hodnotenie: z 1 ml krvi možno získať ~10^6 buniek s 95–98 % životn

Kartička 6

Otázka: Aký výsledok koncentrácie leukocytov sa všeobecne očakáva v periférnej krvi podľa textu?

Odpoveď: Všeobecne sa koncentrácia leukocytov uvádza ako približne 6 ×10^6/ml krvi.

Kartička 7

Otázka: Aký je postup izolácie mononukleárnych leukocytov (MNLE) pomocou separačnej tekutiny?

Odpoveď: 1) 2 ml krvi riediť vo FFR alebo Hanksovom roztoku (1:1–1:4); 2) opatrne navrstvíť na 3 ml separačnej tekutiny bez miešania; 3) centrifugovať 20 min p

Kartička 8

Otázka: Kde sa po centrifugácii nachádzajú jednotlivé frakcie krvi pri separačnej tekutine?

Odpoveď: Biela vrstva v interfáze obsahuje mononukleárne leukocyty (MNL) a trombocyty; na dne sú erytrocyty a polymorfonukleárne leukocyty (PMNL).

Kartička 9

Otázka: Aké metódy izolácie leukocytov sú v texte uvedené okrem osmotickej lýzy a separačnej tekutiny?

Odpoveď: Izolácia všetkých leukocytov, izolácia mononukleárnych leukocytov a izolácia lymfocytov pomocou magnetickej separácie (paramagnetické častice označené

Kartička 10

Otázka: Na akej princípe funguje magnetická separácia lymfocytov podľa textu?

Odpoveď: Použitie paramagnetických častíc označených protilátkami proti membránovým CD antigénom vybranej subpopulácie leukocytov umožní separáciu pomocou magn