PCR y Electroforesis en Gel: Fundamentos y Aplicaciones Clave
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Pregunta: ¿Qué es la PCR y cuál es su objetivo principal?
Respuesta: La Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) es una técnica de amplificación de ácidos nucleicos que obtiene millones de copias de un fragmento concre
Pregunta: ¿Para qué se utiliza la PCR en el contexto de control sanitario de poblaciones o cultivos?
Respuesta: Se utiliza para identificar el parásito u organismo causante de una infección, permitiendo diagnóstico rápido y control del estado sanitario de las po
Pregunta: Menciona tres aplicaciones prácticas de la PCR.
Respuesta: Clonación, secuenciación y análisis genético; identificación de tipos virales y microorganismos; aplicaciones en diagnóstico, citodiagnóstico, análisi
Pregunta: Enumera los componentes básicos que contiene la mezcla de reacción (MasterMix) para PCR.
Respuesta: ADN molde, dos primers (cebadores) P1 y P2, MgCl2, DNA polimerasa termoestable (Taq) y los cuatro desoxirribonucleótido trifosfatos (dATP, dGTP, dCTP,
Pregunta: ¿Cuál es la función del MgCl2 en la mezcla de PCR?
Respuesta: Estabiliza las cadenas sencillas de ADN tras la desnaturalización y durante la síntesis; actúa como cofactor de la ADN polimerasa.
Pregunta: ¿Por qué se usa una DNA polimerasa termoestable como la Taq en PCR?
Respuesta: Porque resiste altas temperaturas (funciona óptimamente alrededor de 80°C y soporta temperaturas superiores a 100°C) sin desnaturalizarse, permitiendo
Pregunta: ¿Qué es un primer (cebador) en PCR y cuántos se usan por reacción?
Respuesta: Son oligonucleótidos sintéticos de cadena sencilla complementarios a los extremos iniciadores del ADN diana; se usan dos primers por reacción (forward
Pregunta: ¿Cómo se describen y dónde hibrida el primer directo (forward) y el inverso (reverse)?
Respuesta: El primer directo (forward) hibrida con el extremo 3' de la cadena antisentido (cadena molde). El primer inverso (reverse) hibrida con la cadena compl
Pregunta: Menciona dos ventajas de la PCR.
Respuesta: Permite obtener producto usable para clonación, secuenciación y análisis; posibilita la amplificación de ADN de organismos vivos o muertos; es útil pa
Pregunta: Menciona cuatro inconvenientes o limitaciones de la PCR.
Respuesta: La polimerización puede introducir errores; requiere primers específicos (20–40 pb) complementarios a la secuencia objetivo; es altamente sensible a c