Instrumentální Chromatografické Techniky: Kompletní Rozbor
Klepni pro otočení · Swipni pro navigaci
14 kartiček
Otázka: Co znamená zkratka HPLC a jaký typ chromatografie označuje?
Odpověď: HPLC = vysokoúčinná kapalinová chromatografie (high-performance liquid chromatography), forma kapalinové chromatografie.
Otázka: Jaké základní části tvoří HPLC přístroj (schéma průtoku)?
Odpověď: Zásobník mobilní fáze → pumpa → autosampler/injektor → vzorek → HPLC kolona (stacionární fáze) → detektor → výpočetní systém.
Otázka: Jaké požadavky platí pro mobilní fázi (MF) v kapalinové chromatografii?
Odpověď: Eluační směsi podle eluotropní řady, vysoká čistota (p.a., HPLC grade), nízká viskozita, neměla by rušit detektor ani poškozovat stacionární fázi.
Otázka: Jaké režimy eluce zajišťuje pumpa a jaké průtoky jsou typické?
Odpověď: Pumpa zajišťuje stálý přísun MF při průtocích 0,01–10 ml/min. Lze provádět isokratickou eluci (stálé složení MF) nebo gradientovou eluci (mění se slož
Otázka: Jaké typy stacionární fáze (SF) se používají v HPLC podle konstrukce kolony?
Odpověď: Monolitické kolony (jeden kus pórovitého materiálu, nižší zpětný tlak, různé póry) a náplňové kolony (obal z kovu plněný mikročásticemi, vysoká účinno
Otázka: Jak závisí rozlišovací schopnost kolony na velikosti částic SF? Co je HETP?
Odpověď: Menší částice obvykle zvyšují účinnost separace, ale zvyšují zpětný tlak. HETP (výškový ekvivalent teoretického patra) je parametr rozlišovací schopno
Otázka: Jaké jsou rozdíly mezi klasickou HPLC a UHPLC podle velikosti částic?
Odpověď: Klasická HPLC používá částice >2 μm; Ultra‑HPLC (UHPLC) používá částice <2 μm.
Otázka: Jak se dělí chromatografické módy podle povahy stacionární a mobilní fáze? Uveď příklady.
Odpověď: Reverzní fáze: nepolární SF, polární MF (nejčastěji; běžné C8, C18 modifikace silikagelu). Normální fáze (HILIC): polární SF, nepolární MF. Iontově‑vý
Otázka: Co jsou příklady chemických modifikací stacionární fáze?
Odpověď: Uhlovodíkové fragmenty (C8, C18), aminy, amidy a další funkční skupiny pro úpravu interakcí se složkami směsi.
Otázka: Jak funguje iontově‑výměnná chromatografie v rámci kapalinové chromatografie?
Odpověď: Ionty z mobilní fáze jsou navázané na iontoměniči; zvyšující se iontová síla MF postupně uvolňuje vázané ionty podle síly iontové vazby — vhodné pro a