Transport plynov krvou
Klíčové pojmy: Hb je heterotetramér alfa2beta2 s 4 hémami, Mb je monomér s 1 hémom a vysokou afinitou k O$_2$, Kooperativita Hb spôsobuje sigmoidnú krivku viazby O$_2$, Bohrov efekt: H^+ protonuje His146 a stabilizuje T-stav, CO2 tvorí karbaminozvyšky na N-koncoch globínu a uvoľňuje H^+, 2,3-BPG viaže centrálny vak v T-stave a znižuje afinita Hb, Karboanhydráza II urýchľuje premenu CO2 na HCO3^- + H^+, Chloridový posun (AE1) vymieňa HCO3^- za Cl^- medzi erytrocytom a plazmou, V tkanivách stúpa CO2 a H^+ -> posun Hb krivky doprava, V pľúcach opačné podmienky podporujú naviazanie O2 a uvoľnenie CO2
## Úvod
Transport plynov krvou zabezpečuje dodávku kyslíka do tkanív a odstraňovanie oxidu uhličitého zo zásobných miest do pľúc. Tento proces vyžaduje spoluprácu proteínov s rôznou kinetikou viazania kyslíka a enzýmu, ktorý rýchlo premieňa plyn na rozpustný anión.
> Definícia: Transport dýchacích plynov v krvi je zabezpečený koordinovanou súčinnosťou dvoch hemoproteinov s odlišnou alosterickou kinetikou a vnútrobunkového zinkového enzýmu, ktorý premieňa plyn na rozpustný anión.
## 1. Hemoglobín a myoglobín — základné rozdiely
### Hemoglobín (Hb)
- **Štruktúra:** heterotetramér alfa2beta2. Každá podjednotka obsahuje hém s viazaným Fe$^{2+}$.
- **Funkcia:** hlavný transportér kyslíka v krvi, viaže O$_2$ reverzibilne.
- **Alosterická kooperativita:** viazba O$_2$ na jednu podjednotku spôsobí konformačnú zmenu (posun Fe do roviny porfyrínu, pohyb proximálneho histidínu), ktorá zvyšuje afinitu susedných podjednotiek — prechod z T-stavu (deoxy-Hb, nízka afinita) do R-stavu (oxy-Hb, vysoká afinita). Grafviazby je sigmoidný.
### Myoglobín (Mb)
- **Štruktúra:** monomér s jedným hémom.
- **Funkcia:** zásobárňa kyslíka v svale, uvoľňuje O$_2$ len pri výraznom poklese parciálneho tlaku kyslíka.
- **Kinetika:** nemá kooperativitu, krivka viazby je hyperbola, veľmi nízka hodnota $P_{50}$ (vysoká afinita).
> Definícia: Myoglobín je svalový hemoproteín slúžiaci ako intracelulárna zásoba kyslíka a nemá alosterické vlastnosti.
### Porovnávacia tabuľka
| Vlastnosť | Hemoglobín (Hb) | Myoglobín (Mb) |
|---|---:|---:|
| Stav | Tetramér (alfa2beta2) | Monomér |
| Hém | 4 hémy (4 Fe$^{2+}$) | 1 hém (1 Fe$^{2+}$) |
| Kooperativita | Áno, sigmoidná krivka | Nie, hyperbola |
| Funkcia | Transport O$_2$ v krvi | Intracelulárna zásoba O$_2$ |
Fun fact: Hb je schopný zmeniť svoju afinitu ku kyslíku v závislosti od metabolického stavu tkaniva pomocou lokálnych chemických signálov.
## 2. Alosterická regulácia väzby O$_2$ hemoglobínom
Afinita Hb ku kyslíku klesá v tkanivách v dôsledku troch hlavných alosterických efektorov, ktoré posúvajú krivku viazby doprava (ľahšie uvoľnenie O$_2$):
### A) Bohrov efekt (vplyv H$^+$)
- Metabolicky aktívne tkanivo produkuje H$^+$.
- Protonácia špecifických histidínov (najmä His146 na beta reťazci) vedie k vzniku solných mostíkov s aspartátom, ktoré stabilizujú T-stav hemoglobínu.
- Výsledok: znížená afinita Hb ku O$_2$ v tkanive, čo podporuje uvoľnenie kyslíka.
### B) Vplyv CO$_2$ (karbaminohemoglobín)
- CO$_2$ reaguje s voľnými N-koncami globínových reťazcov za vzniku karbamátových väzieb: $$\ce{R-NH2 + CO2 <=> R-NH-COO^- + H^+}$$
- Reakcia uvoľní H$^+$ (posilnenie Bohrovho efektu) a záporný náboj karbamátu pomáha stabilizovať T-stav cez solné mostíky.
### C) 2,3-Bisfosfoglycerát (2,3-BPG)
- 2,3-BPG vzniká v erytrocytoch cez glykolytický bypass.
- Naviaže sa do centrálnej dutiny tetraméru len v T-stave a elektrostaticky "uzamkne" T-stav, čím znižuje afinitu Hb ku O$_2$.
### Praktický príklad: sval pri fyzickej námahe
- Zvýšený metabolizmus -> viac CO$_2$ a H$^+$ -> posun Hb krivky doprava -> ľahšie uvoľnenie O$_2$ do aktívneho svalu.
Did you know that pri stúpaní do veľkých nadmorských výšok sa zvýši koncentrácia 2,3-BPG v erytrocytoch, čo znižuje afinita Hb ku O$_2$ a podporuje uvoľňovanie kyslíka do tkanív?
## 3. Transport CO2 a úloha karboanhydrázy
- Väčšina CO$_2$ vyprodukovaného bunkami (asi 70 %) sa transportuje v krvi vo forme bikarbonátu HCO$_3^-$.
> Definícia: Karboanhydráza II je zinkový metaloenzým v cytosóle erytrocytu, ktorý značným spôsobom urýchľuje premenu CO$_2$ a vody na kyselinu uhličitú a následne na HCO$_3^-$ a H$^+$.
### Reakcia v erytrocytoch tkaniva
$$\ce{CO2 + H2O <=> H2CO3 <=> HCO3^- + H^+}$$
- Karboanhydráza II urýchľuje dosiahnutie rovnováhy.
### Choridový posun (Hamburgerov fenomén)
- Vyrobený anión HCO$_3^-$ je vymenený za Cl$^-$ cez antiport AE1 (band 3) z erytrocytu do plazmy, čím sa zachová elektrická neutralita.
- V pľúcach proces prebieha opačne: HCO$_3^-$ v