Test na Fagocytóza: Mechanizmy, testy a poruchy

Otázka 1: Percento cídnej aktivity pod 25% indikuje možnú prítomnosť defektu v jednom alebo viacerých mikrobicídnych mechanizmoch.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: Študijný materiál uvádza, že percento cídnej aktivity pod 25% indikuje možnú prítomnosť defektu v jednom alebo viacerých mikrobicídnych mechanizmoch.

Otázka 2: Fagocytóza je zložitý proces, ktorý sa skladá z viacerých, na seba nadväzujúcich medzistupňov.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: Fagocytóza je zložitý proces, ktorý sa skladá z viacerých, na seba nadväzujúcich medzistupňov, ako sú migrácia fagocytov, adherencia častíc, pohĺtenie a deštrukcia materiálu.

Otázka 3: Ktoré tvrdenie najlepšie opisuje princíp kvantitatívneho kolorimetrického testu na hodnotenie respiračného vzplanutia, ako je napríklad INT test?

A. Tento test zahŕňa inkubáciu izolovaných PMNL s tetrazóliovými soľami, ktoré sú v aktivovaných bunkách redukované na nerozpustný fialový formazán, pričom absorbancia tohto roztoku sa následne meria spektrofotometrom po extrakcii.

B. Test hodnotí zmeny v expresii adhezívnych molekúl (CAM) na povrchu fagocytov pomocou prietokového cytometra, čím indikuje ich migračnú schopnosť.

C. Princíp spočíva v priamej detekcii tvorby superoxidového aniónu (O₂⁻) pomocou špecifických fluorescenčných sond, ktoré sa viažu na NADPH-oxidázu.

D. Test meria počet živých a mŕtvych baktérií po ingescii fagocytmi pomocou priameho mikroskopického počítania farbených kolónií.

Vysvetlenie: Podľa študijného materiálu, najpoužívanejší kvantitatívny kolorimetrický test (napr. INT test) spočíva v inkubácii izolovaných PMNL so stimulačnými časticami a tetrazóliovými soľami. Tieto soli prenikajú do buniek a v aktivovaných fagocytujúcich bunkách sú redukované na nerozpustný fialový formazán. Formazán sa následne extrahuje solubilizačným roztokom (napr. metanolom) a absorbancia farebného roztoku sa hodnotí spektrofotometrom pri A₄₆₅. Ostatné možnosti opisujú iné metódy alebo nepravdivé tvrdenia.

Otázka 4: Ktoré z nasledujúcich tvrdení platia pre hodnotenie ingescie fagocytov podľa poskytnutých študijných materiálov?

A. Pri in vitro testovaní ingescie sa môžu použiť metakrylátové hydrofilné častice (MSHP) alebo suspenzia baktérií ako Escherichia coli.

B. Nevýhodou testovania ingescie s celou heparinizovanou krvou je malý počet hodnotených leukocytov, obvykle 100.

C. Phagotest™ využíva prietokový cytometer a umožňuje nezávislé vyhodnotenie fagocytózy neutrofilov a monocytov.

D. Fagocytová aktivita (FA) sa vyjadruje ako percento fagocytov s pohltenými časticami zo všetkých počítaných fagocytov.

Vysvetlenie: Študijné materiály uvádzajú, že na in vitro testovanie ingescie je možné použiť metakrylátové hydrofilné častice (MSHP) alebo suspenzie baktérií ako E. coli (sekcia 10.1). Ďalej je spomenuté, že náročnosť mikroskopického vyhodnocovania vzoriek z celej heparinizovanej krvi a malý počet hodnotených leukocytov (obvykle 100) sú nevýhody klasického testu (sekcia 10.1). Materiál tiež potvrdzuje, že Phagotest™ je založený na princípe testovania ingescie fluoresceínom značených E. coli pomocou prietokového cytometra, je rýchlejší, citlivejší, spoľahlivejší a umožňuje nezávisle vyhodnotiť fagocytózu neutrofilov alebo monocytov (sekcia 10.1). Vzorec pre fagocytovú aktivitu (FA) je uvedený ako 'Počet fagocytov s pohltanými časticami / Celkový počet počítaných fagocytov x 100' (sekcia 10.1.1.3). Všetky uvedené tvrdenia sú preto správne.

Otázka 5: PHAGOBURST® a FagoFlow™ testy sa používajú na meranie chemiluminiscenčnej (CL) aktivity, ktorá závisí od NADPH oxidázy a myeloperoxidázy.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: PHAGOBURST® a FagoFlow™ testy sú založené na prietokovej cytometrii s použitím dihydrorodamínu 123 (DHR), ktorý je oxidovaný peroxidom vodíka na rodámin 123. Meranie chemiluminiscenčnej (CL) aktivity je iná možnosť hodnotenia metabolickej aktivácie a produkcie ROI v PMNL, ktorá závisí od NADPH oxidázy a myeloperoxidázy, ale nie je to princíp PHAGOBURST ani FagoFlow testov.