Flashcards de Técnicas de Biologia Molecular Essenciais
Técnicas de Biologia Molecular Essenciais: Guia Completo
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Retrovírus e PCR
9 cartões
Cartão 1
Pergunta: O que faz a transcriptase reversa nos retrovírus de RNA?
Resposta: Copia uma cadeia de RNA em DNA de dupla cadeia (dsDNA) que pode ser integrado no DNA do hospedeiro; é usada na replicação de retrovírus como o HIV.
Cartão 2
Pergunta: Que tipo de polimerase é a transcriptase reversa?
Resposta: É uma DNA polimerase dependente de RNA.
Cartão 3
Pergunta: A transcriptase reversa necessita de what para iniciar a síntese de DNA?
Resposta: Necessita de um primer para a síntese de DNA — um tRNA celular.
Cartão 4
Pergunta: A transcriptase reversa tem atividade de proofreading? Qual a consequência?
Resposta: Não possui função de proofreading, resultando numa taxa de erro muito elevada (~1/20 000) e consequente hipermutabilidade dos vírus de RNA.
Cartão 5
Pergunta: Qual a relação estrutural entre a transcriptase reversa do HIV e a DNA pol I?
Resposta: O fragmento Klenow da Pol I tem estrutura 3D similar à transcriptase reversa do HIV.
Cartão 6
Pergunta: O que significa RT-PCR?
Resposta: Reverse Transcription PCR (Transcrição reversa seguida de PCR) — síntese de DNA complementar (cDNA) a partir de RNA seguida de amplificação por PCR.
Cartão 7
Pergunta: Quais são algumas aplicações da técnica PCR relevantes ao tópico?
Resposta: Deteção e amplificação de DNA (incluindo deteção de infeções virais), clonagem de segmentos raros, estudos da evolução de vírus patogénicos e diagnóst
Cartão 8
Pergunta: Por que a PCR é considerada extremamente sensível?
Resposta: Porque consegue detetar e amplificar até uma única molécula de DNA presente em praticamente qualquer tipo de amostra.
Cartão 9
Pergunta: Quais cuidados são essenciais ao utilizar PCR devido à sua sensibilidade?
Resposta: Evitar contaminação das amostras; realizar controlos para garantir que o DNA amplificado não provém do investigador nem de contaminantes bacterianos.