Tarjetas de Microscopía: Fundamentos y Técnicas Avanzadas

Microscopía: Fundamentos y Técnicas Avanzadas para Estudiantes

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¿Cuál es el propósito principal de la fijación primaria con glutaraldehído en la preparación de muestras para microscopía electrónica?

Estabilizar proteínas y estructuras de membranas mediante entrecruzamiento covalente, preservando la morfología celular cercana al estado fisiológico.

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Microscopía electrónica - Preparación de muestras

22 tarjetas

Tarjeta 1

Pregunta: ¿Cuál es el propósito principal de la fijación primaria con glutaraldehído en la preparación de muestras para microscopía electrónica?

Respuesta: Estabilizar proteínas y estructuras de membranas mediante entrecruzamiento covalente, preservando la morfología celular cercana al estado fisiológico.

Tarjeta 2

Pregunta: ¿Con qué grupos reacciona el glutaraldehído y qué preserva esta reacción?

Respuesta: Reacciona con grupos amino de proteínas y fosfolípidos, preservando la morfología celular.

Tarjeta 3

Pregunta: ¿Cuál es la concentración óptima y el pH recomendados para la fijación con glutaraldehído?

Respuesta: Entre 2.5-4% en buffer fosfato o cacodilato a pH 7.2-7.4.

Tarjeta 4

Pregunta: ¿Qué tiempos y temperaturas de incubación son típicos para la fijación primaria con glutaraldehído?

Respuesta: Tiempos de 1-4 horas a temperatura ambiente o a 4°C durante períodos prolongados.

Tarjeta 5

Pregunta: ¿Qué papel cumple la post-fijación con tetróxido de osmio (OsO4)?

Respuesta: Complementa la fijación primaria estabilizando membranas lipídicas y proporcionando contraste electrónico.

Tarjeta 6

Pregunta: ¿A qué componentes se une preferentemente el osmio y qué efecto produce en las imágenes electrónicas?

Respuesta: Se une a dobles enlaces de ácidos grasos insaturados y grupos sulfhidrilo, generando depósitos metálicos densos que aparecen oscuros en imágenes elect

Tarjeta 7

Pregunta: ¿Cuáles son las concentraciones típicas y el tiempo de exposición para la post-fijación con osmio?

Respuesta: Concentraciones entre 1-2% durante 1-2 horas.

Tarjeta 8

Pregunta: ¿Qué precaución de seguridad es necesaria al manipular tetróxido de osmio?

Respuesta: Manipular en campana extractora debido a su toxicidad.

Tarjeta 9

Pregunta: ¿Cuál es el objetivo del proceso de deshidratación en la preparación de muestras?

Respuesta: Eliminar progresivamente el agua tisular mediante series graduales de solventes orgánicos para evitar daños y permitir inclusión en resina.

Tarjeta 10

Pregunta: ¿Qué solventes se usan típicamente en la deshidratación y en qué rango de concentraciones?

Respuesta: Etanol o acetona en concentraciones crecientes desde 30% hasta 100%.