Microscopía: Fundamentos y Técnicas Avanzadas para Estudiantes
Toca para girar · Desliza para navegar
22 tarjetas
Pregunta: ¿Cuál es el propósito principal de la fijación primaria con glutaraldehído en la preparación de muestras para microscopía electrónica?
Respuesta: Estabilizar proteínas y estructuras de membranas mediante entrecruzamiento covalente, preservando la morfología celular cercana al estado fisiológico.
Pregunta: ¿Con qué grupos reacciona el glutaraldehído y qué preserva esta reacción?
Respuesta: Reacciona con grupos amino de proteínas y fosfolípidos, preservando la morfología celular.
Pregunta: ¿Cuál es la concentración óptima y el pH recomendados para la fijación con glutaraldehído?
Respuesta: Entre 2.5-4% en buffer fosfato o cacodilato a pH 7.2-7.4.
Pregunta: ¿Qué tiempos y temperaturas de incubación son típicos para la fijación primaria con glutaraldehído?
Respuesta: Tiempos de 1-4 horas a temperatura ambiente o a 4°C durante períodos prolongados.
Pregunta: ¿Qué papel cumple la post-fijación con tetróxido de osmio (OsO4)?
Respuesta: Complementa la fijación primaria estabilizando membranas lipídicas y proporcionando contraste electrónico.
Pregunta: ¿A qué componentes se une preferentemente el osmio y qué efecto produce en las imágenes electrónicas?
Respuesta: Se une a dobles enlaces de ácidos grasos insaturados y grupos sulfhidrilo, generando depósitos metálicos densos que aparecen oscuros en imágenes elect
Pregunta: ¿Cuáles son las concentraciones típicas y el tiempo de exposición para la post-fijación con osmio?
Respuesta: Concentraciones entre 1-2% durante 1-2 horas.
Pregunta: ¿Qué precaución de seguridad es necesaria al manipular tetróxido de osmio?
Respuesta: Manipular en campana extractora debido a su toxicidad.
Pregunta: ¿Cuál es el objetivo del proceso de deshidratación en la preparación de muestras?
Respuesta: Eliminar progresivamente el agua tisular mediante series graduales de solventes orgánicos para evitar daños y permitir inclusión en resina.
Pregunta: ¿Qué solventes se usan típicamente en la deshidratación y en qué rango de concentraciones?
Respuesta: Etanol o acetona en concentraciones crecientes desde 30% hasta 100%.