Resumen de Documentoscopia Forense: Técnicas Analíticas

## Introducción La medicina forense y la criminalística aplican técnicas de laboratorio para recuperar, analizar y comparar evidencias físicas. En este material veremos técnicas generales y procedimientos prácticos aplicables a evidencias en papel y extractos, centrados en métodos de extracción, preparación de muestras, espectrofotometría visible y cromatografía líquida de alta performance (HPLC), presentados de forma didáctica para estudiantes a distancia. > Definición: La **evidencia física** es cualquier material obtenido en la escena o en un examen judicial que puede aportar información sobre la comisión de un hecho. ## 1. Preparación y muestreo de piezas en papel ### Objetivos del muestreo - Extraer compuestos solubles (por ejemplo tintas o contaminantes) sin destruir información útil. - Obtener controles: zonas sin escritura y zonas de escritura no sospechosa. ### Materiales y equipo básicos - Aguja calibre 20 para perforar segmentos (modo sacabocado) - Tubos Eppendorf de 1,5 ml - Hilo metálico para transferir segmentos - Solvente de extracción (ejemplo: tampón HEPES $0{,}005\ \mathrm{M}$ pH $4{,}7$) - Baño ultrasónico - Centrífuga o filtros de $0{,}2\ \mu\mathrm{m}$ > Definición: Un **control de extracción** es una muestra tomada de una zona sin escritura o sin sospecha de alteración, que sirve como referencia para comparar resultados. ### Procedimiento paso a paso 1. Perforar el documento con una aguja calibre 20 y obtener 10 segmentos por muestra. 2. Transferir los 10 segmentos a un tubo Eppendorf de 1,5 ml con un hilo metálico. 3. Agregar $0{,}5\ \mathrm{ml}$ del solvente de extracción (el mismo que la fase móvil en HPLC cuando corresponda). 4. Colocar el tubo en baño ultrasónico durante 15 minutos para favorecer la extracción. 5. Centrifugar para sedimentar fibras o filtrar por filtros de $0{,}2\ \mu\mathrm{m}$. 6. Conservar extractos etiquetados y registrar condiciones (pH, solvente, tiempo, lote del documento). ### Consejos prácticos - Siempre procesar controles junto con las muestras sospechosas. - Registrar exactamente volumen, tipo de solvente y tiempo de ultrasonido. - Utilizar guantes y herramientas limpias para evitar contaminación cruzada. ## 2. Espectrofotometría visible aplicada a extractos ### Principio básico La espectrofotometría visible mide la absorbancia en función de la longitud de onda para identificar diferencias en los extractos por comparación de espectros. > Definición: La **absorbancia** es la medida de la luz absorbida por una solución en una longitud de onda específica; se relaciona con concentración según la ley de Beer-Lambert. ### Equipamiento y parámetros sugeridos - Cubetas de vidrio de volumen pequeño. - Rango de escaneo: $350$ a $750\ \mathrm{nm}$ con ancho de banda $1\ \mathrm{nm}$. - Registrar el espectro del solvente puro como línea de base. - Medir espectros del papel sin tinta y de zonas confiables y bajo sospecha. ### Procedimiento y procesamiento de datos 1. Escanear el solvente de extracción puro y usarlo como línea de base (blank). 2. Obtener espectros de: papel sin tinta, zona confiable, zona sospechosa. 3. Repetir mediciones y promediar al menos $50$ espectros para mejorar relación señal/ruido. 4. Aplicar filtros matemáticos: derivada primera y segunda para resaltar pequeñas diferencias. ### Ejemplo práctico - Si un extracto muestra un máximo a $520\ \mathrm{nm}$ y otro a $525\ \mathrm{nm}$, la segunda derivada puede facilitar la visualización de desplazamientos sutiles en los máximos. Did you know que promediar múltiples espectros reduce ruido aleatorio y mejora la reproducibilidad de las comparaciones? ## 3. Cromatografía líquida de alta performance (HPLC) — enfoque general ### Objetivo Separar componentes presentes en el extracto y comparar cromatogramas entre controles y muestras sospechosas por número de picos, tiempos de retención y alturas relativas. > Definición: Un **cromatograma** es el registro de la señal del detector en