Documentoscopia Forense: Técnicas Analíticas Clave y Métodos
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Pregunta: ¿Qué solvente se prepara como HEPES 0,005 M y pH 4,7 para uso en el laboratorio de toxicología?
Respuesta: Solvente: HEPES 0,005 M ajustado a pH 4,7, que se utiliza también como fase móvil en cromatografía líquida de fase reversa.
Pregunta: ¿Cómo se obtienen los segmentos de papel procedentes del documento en el procedimiento descrito?
Respuesta: Se obtienen mediante una aguja calibre 20 usada a modo de sacabocado para cortar segmentos del documento.
Pregunta: ¿Cuántos segmentos y cómo se transfieren para la extracción de tinta?
Respuesta: Transferir 10 segmentos a un tubo Eppendorf de 1,5 ml ayudándose con un hilo metálico.
Pregunta: ¿Qué volumen de solvente de extracción se añade a los segmentos en el Eppendorf y qué se hace después?
Respuesta: Agregar 0,5 ml del solvente de extracción y colocar en baño ultrasónico durante 15 minutos para facilitar la extracción de la tinta.
Pregunta: ¿Qué controles de muestra de papel deben incluirse al extraer tinta?
Respuesta: Agregar muestras de zonas sin escritura y de zonas donde la tinta no está bajo sospecha.
Pregunta: ¿Cómo se eliminan las fibras de papel en suspensión tras la extracción?
Respuesta: Centrifugar los Eppendorf para sedimentar las fibras o filtrar por filtros para muestras de 0,2 micras.
Pregunta: ¿Qué rango espectral y condiciones se recomienda para el escaneo en espectrofotometría visible del solvente de extracción?
Respuesta: Realizar un escaneo entre 350 y 750 nm con ancho de banda de 1 nm; usar el solvente de extracción puro como línea de base.
Pregunta: ¿Qué espectros deben obtenerse y cuántos se recomienda promediar en espectrofotometría visible?
Respuesta: Obtener espectro del papel sin tinta, de zonas confiables y de zonas bajo sospecha; se recomienda obtener al menos 50 espectros y promediarlos.
Pregunta: ¿Qué procesamiento de datos se sugiere para resaltar pequeñas diferencias en espectros?
Respuesta: Obtener la primera y segunda derivada con software de análisis estadístico para resaltar pequeñas diferencias.
Pregunta: ¿Cómo se debe preparar la columna y qué características tiene para el análisis por HPLC?
Respuesta: Equilibrar una columna de fase reversa (C18) de 20 cm de largo y partículas de 5 micras con la misma fase móvil usada en la extracción.