Shrnutí na Základy biochemického laboratorního vyšetření
Základy Biochemického Vyšetření: Průvodce pro Studenty
Úvod
Předanalytika zahrnuje všechny kroky před laboratorním vyšetřením, které ovlivňují kvalitu biologického vzorku a spolehlivost výsledků. Správné odběry, zpracování a skladování krve jsou klíčové pro validní biochemická vyšetření.
Definice: Předanalytika je soubor postupů a podmínek týkajících se odebrání, transportu, zpracování a skladování biologického materiálu před vlastním laboratorním měřením.
1. Druhy odebrané krve a jejich použití
Typy krve
- Žilní krev: nejčastěji používaná pro biochemická vyšetření.
- Tepenná krev: hlavně pro stanovení krevních plynů.
- Kapilární krev: pro malé objemy, např. glukometry.
Definice: Kapilární krev je směs arteriální, venózní a intersticiální tekutiny získaná bodnutím prstu nebo paty.
Praktický příklad
- Glukometr používá kapilární krev při domácím monitorování glykemie.
2. Získání plasmy vs. séra
Srovnání (tabulka)
| Vlastnost | Sérum | Plazma |
|---|---|---|
| Zkumavka | bez antikoagulancií | s antikoagulanciemi |
| Obsahuje fibrinogen | ne | ano |
| Použití | mnoho biochem. testů | kdy je potřeba fibrinogen nebo jiné nestandardní testy |
Definice: Sérum je tekutina získaná po srážení krve po odstranění fibrinu a buněk.
Jak získat sérum
- Odebírá se do zkumavky bez protisrážlivých prostředků.
- Počkejte na srážení $15$–$30$ minut (lze použít akcelerátory srážení).
- Centrifugujte a oddělte sérum.
Jak získat plazmu
- Do zkumavky s krví se přidává antikoagulační činidlo (obvykle přítomné již ve zkumavce).
- Po centrifugaci získáme plazmu (obsahuje fibrinogen).
Běžná antikoagulační činidla
- Citrát trisodný: váže Ca^{2+} a zabraňuje koagulaci.
- EDTA (Na+/K+ soli): chelatuje ionty, zabraňuje koagulaci.
- Heparin (Na+, NH4+, Li+): omezuje faktor Xa a aktivuje antitrombin III.
Definice: Antikoagulancium je látka, která brání srážení krve během odběru a zpracování vzorku.
3. Další přidané látky ve zkumavkách
- Fluorid: inhibuje enzym enolázu, zastavuje glykolýzu erytrocytů a zabraňuje odběru glukózy z plazmy.
4. Centrifugace krve
- Princip: odstředivá síla urychluje sedimentaci těžších složek.
- Podmínky: pokojová teplota nebo $4 extrm{°C}$, doba $5$–$15$ minut, $1000$–$2000$ ot./min.
Výsledek centrifugace nesrážlivé krve
- Horní vrstva: plazma
- Střední tenká vrstva: buffy coat (asi $1%$) — leukocyty a trombocyty
- Spodní vrstva: erytrocyty
Definice: Buffy coat je tenká bělavá vrstva mezi plazmou a erytrocyty obsahující leukocyty a trombocyty.
Hematokrit
- Pomocí centrifugace lze určit hematokrit: podíl objemu erytrocytů na celkovém objemu krve.
5. Skladování vzorku
- Krátkodobě: plazma nebo sérum v lednici při $4\textrm{°C}$.
- Dlouhodobě: zmrazení (dodržet ochranu před světlem).
6. Abnormální zabarvení vzorků a příčiny
- Hemolytický vzorek: rozpad erytrocytů uvolní hemoglobin, LD, K^{+} apod. Může vzniknout in vivo (onemocnění) nebo in vitro (neopatrné zacházení, vysoká teplota, malá jehla). Po centrifugaci je vzorek červený.
- Chylózní vzorek: vysoké TG, zkalený a bílý; příčina: nedodržení lačnění nebo hyperlipidemie.
- Ikterický vzorek: zvýšený bilirubin, nažloutlé zabarvení (hyperbilirubinemie).
7. Faktory ovlivňující výsledky před analýzou
Fyzická aktivita
- Zvýšení permeability svalových buněk → nárůst CK, ALT, AST, LD, kreatinin, fosfát.
- Po intenzivní námaze klesá glykemie; anaerobní glykolýza zvyšuje laktát → může klesat pH.
- Dehydratace zvyšuje koncentraci celkových proteinů a hematokritu.
- Doporučení: vyhnout se fyzické aktivitě před odběrem (kromě cíleného měření laktátu ve sportovní medicíně).
Dieta a lačnění
- Před biochemickými testy se obvykle doporučuje lačnit (např. test glukózy).
- Masitá strava zvyšuje močovinu a kyselinu močovou; uvolněné
Zaregistruj se pro celé shrnutíUž máš účet? Přihlásit se
Předanalytika — zpracování krve
Klíčová slova: Laboratorní vyšetření, Předanalytika
Klíčové pojmy: Rozlišit žilní, tepennou a kapilární krev podle účelu odběru, Sérum získáme po srážení $15$–$30$ minut a centrifugaci, Plazma vzniká při použití antikoagulancií: citrát, EDTA, heparin, Centrifugace: $1000$–$2000$ ot./min, $5$–$15$ min, pokojová teplota nebo $4\textrm{°C}$, Buffy coat ~ $1\%$ objemu, obsahuje leukocyty a trombocyty, Vzorky skladovat při $4\textrm{°C}$ krátkodobě, jinak zmrazit a chránit před světlem, Hemolýza, chylóza a ikterus zkreslují výsledky — identifikovat před analýzou, Vyhnout se fyzické aktivitě a stravě před odběrem; doporučené lačnění pro glukózu, Poloha pacienta vsedě po $15$ minutách snižuje variabilitu výsledků, Chronický alkohol: zvýšení jaterních enzymů a charakter AST/ALT $>2$, Kouření zvyšuje cholesterol, TG, fibrinogen a karbonylhemoglobin, Předanalytické chyby vznikají hlavně při nesprávném odběru, manipulaci a skladování