Shrnutí na Základy biochemického laboratorního vyšetření

## Úvod Předanalytika zahrnuje všechny kroky před laboratorním vyšetřením, které ovlivňují kvalitu biologického vzorku a spolehlivost výsledků. Správné odběry, zpracování a skladování krve jsou klíčové pro validní biochemická vyšetření. > Definice: Předanalytika je soubor postupů a podmínek týkajících se odebrání, transportu, zpracování a skladování biologického materiálu před vlastním laboratorním měřením. ## 1. Druhy odebrané krve a jejich použití ### Typy krve - **Žilní krev**: nejčastěji používaná pro biochemická vyšetření. - **Tepenná krev**: hlavně pro stanovení krevních plynů. - **Kapilární krev**: pro malé objemy, např. glukometry. > Definice: Kapilární krev je směs arteriální, venózní a intersticiální tekutiny získaná bodnutím prstu nebo paty. ### Praktický příklad - Glukometr používá kapilární krev při domácím monitorování glykemie. ## 2. Získání plasmy vs. séra ### Srovnání (tabulka) | Vlastnost | Sérum | Plazma | |---|---:|---:| | Zkumavka | bez antikoagulancií | s antikoagulanciemi | | Obsahuje fibrinogen | ne | ano | | Použití | mnoho biochem. testů | kdy je potřeba fibrinogen nebo jiné nestandardní testy | > Definice: Sérum je tekutina získaná po srážení krve po odstranění fibrinu a buněk. ### Jak získat sérum 1. Odebírá se do zkumavky bez protisrážlivých prostředků. 2. Počkejte na srážení $15$–$30$ minut (lze použít akcelerátory srážení). 3. Centrifugujte a oddělte sérum. ### Jak získat plazmu - Do zkumavky s krví se přidává antikoagulační činidlo (obvykle přítomné již ve zkumavce). - Po centrifugaci získáme plazmu (obsahuje fibrinogen). #### Běžná antikoagulační činidla - **Citrát trisodný**: váže Ca^{2+} a zabraňuje koagulaci. - **EDTA (Na+/K+ soli)**: chelatuje ionty, zabraňuje koagulaci. - **Heparin (Na+, NH4+, Li+)**: omezuje faktor Xa a aktivuje antitrombin III. > Definice: Antikoagulancium je látka, která brání srážení krve během odběru a zpracování vzorku. ## 3. Další přidané látky ve zkumavkách - **Fluorid**: inhibuje enzym enolázu, zastavuje glykolýzu erytrocytů a zabraňuje odběru glukózy z plazmy. ## 4. Centrifugace krve - Princip: odstředivá síla urychluje sedimentaci těžších složek. - Podmínky: pokojová teplota nebo $4 extrm{°C}$, doba $5$–$15$ minut, $1000$–$2000$ ot./min. ### Výsledek centrifugace nesrážlivé krve - Horní vrstva: **plazma** - Střední tenká vrstva: **buffy coat** (asi $1\%$) — leukocyty a trombocyty - Spodní vrstva: **erytrocyty** > Definice: Buffy coat je tenká bělavá vrstva mezi plazmou a erytrocyty obsahující leukocyty a trombocyty. ### Hematokrit - Pomocí centrifugace lze určit hematokrit: podíl objemu erytrocytů na celkovém objemu krve. ## 5. Skladování vzorku - Krátkodobě: plazma nebo sérum v lednici při $4\textrm{°C}$. - Dlouhodobě: zmrazení (dodržet ochranu před světlem). ## 6. Abnormální zabarvení vzorků a příčiny - **Hemolytický vzorek**: rozpad erytrocytů uvolní hemoglobin, LD, K^{+} apod. Může vzniknout in vivo (onemocnění) nebo in vitro (neopatrné zacházení, vysoká teplota, malá jehla). Po centrifugaci je vzorek červený. - **Chylózní vzorek**: vysoké TG, zkalený a bílý; příčina: nedodržení lačnění nebo hyperlipidemie. - **Ikterický vzorek**: zvýšený bilirubin, nažloutlé zabarvení (hyperbilirubinemie). Fun fact: Vzorek může být vizuálně posouzen už bez analýzy — barva často okamžitě naznačí hemolýzu, chylózu nebo ikterii a může urychlit identifikaci preanalytické chyby. ## 7. Faktory ovlivňující výsledky před analýzou ### Fyzická aktivita - Zvýšení permeability svalových buněk → nárůst CK, ALT, AST, LD, kreatinin, fosfát. - Po intenzivní námaze klesá glykemie; anaerobní glykolýza zvyšuje laktát → může klesat pH. - Dehydratace zvyšuje koncentraci celkových proteinů a hematokritu. - Doporučení: vyhnout se fyzické aktivitě před odběrem (kromě cíleného měření laktátu ve sportovní medicíně). ### Dieta a lačnění - Před biochemickými testy se obvykle doporučuje lačnit (např. test glukózy). - Masitá strava zvyšuje močovinu a kyselinu močovou; uvolněné