Nepriama imunohistochémia a prietoková cytometria: Sprievodca pre študentov
Ťukni na otočenie · Potiahni na navigáciu
10 kartičiek
Otázka: Čo je princíp priamého a nepriameho značenia protilátkami pri prietokovej cytometrii?
Odpoveď: Priame: protilátka (Ab) priamo konjugovaná fluorochrómom viazaná na bunkový marker. Nepriame: primárna Ab bez fluorochrómu, následne sekundárna Ab kon
Otázka: Aké typy materiálu sa bežne používajú na prietokovú cytometriu?
Odpoveď: Plná krv, punktáty kostnej drene, separované bunkové populácie, iné telové tekutiny (likvor, exudáty, ascites) a bunkové suspenzie z tkanív.
Otázka: Aké informácie dáva forward scatter (FSC) a side scatter (SSC)?
Odpoveď: FSC udáva veľkosť bunky; SSC udáva morfológiu/granulárnosť bunky.
Otázka: Ako fungujú fluorochrómy v prietokovej cytometrii?
Odpoveď: Fluorochrómy absorbujú svetelnú energiu lasera, excitujú sa a emitujú svetlo inej vlnovej dĺžky, čo sa detekuje ako fluorescenčný signál.
Otázka: Čo sa deje, keď bunky označené monoklonálnou Ab prechádzajú prietokovou komorou?
Odpoveď: Sú excitované laserom, dôjde k lomu a odrazu svetla a emisií fluorescencie; z jednej bunky možno získať viacero fluorescenčných signálov súčasne.
Otázka: Aké grafy sa používajú na zobrazenie výsledkov prietokovej cytometrie a na čo slúžia?
Odpoveď: Scattergram (FSC vs SSC) zobrazuje veľkosť a granularitu leukocytov; histogram je jednorozmerný na hodnotenie fluorescencie značenej jednou Ab; dot pl
Otázka: Na aké biologické otázky sa využíva prietoková cytometria?
Odpoveď: Určenie počtu buniek špecifickej celulárnej imunity a nešpecifickej imunity (monocyty, PMNL), stanovenie stupňa diferenciácie buniek (diagnostika leuk
Otázka: Koľko znakov (markerov) je možné súčasne sledovať pri prietokovej cytometrii podľa textu?
Odpoveď: Súčasné sledovanie 3–9 znakov (markerov).
Otázka: Čo poskytuje fluorescencia pri analýze buniek?
Odpoveď: Informáciu o membránových a cytoplazmatických antigénoch.
Otázka: Prečo je možné z jednej bunky získať niekoľko fluorescenčných signálov naraz?
Odpoveď: Pretože bunky môžu byť označené viacerými protilátkami konjugovanými rôznymi fluorochrómami, ktoré emitujú svetlo na odlišných vlnových dĺžkach pri ex