Test na Metódy molekulárnej biológie

Otázka 1: V rámci PCR-RFLP pre prenatálnu diagnostiku hemofílie A chýba v štandardnej alele génu pre koagulačný faktor VIII restrikčné miesto BclI v intróne 18.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: Štandardná alela génu pre koagulačný faktor VIII naopak obsahuje restrikčné miesto BclI v intróne 18. Mutovaná alela toto restrikčné miesto nemá.

Otázka 2: Ktoré tvrdenie o metóde rýchlej amplifikácie koncov cDNA (RACE) je správne?

A. RACE slúži na amplifikáciu kratších úsekov cDNA z oboch koncov, ak je známa časť sekvencie.

B. 5’-RACE využíva prítomnosť prirodzeného poly(A)-konca na mRNA pre zahájenie amplifikácie.

C. Pre použitie RACE nie je nevyhnutná znalosť žiadnej časti sekvencie mRNA.

D. Metóda RACE sa delí na 5’-RACE a 3’-RACE.

Vysvetlenie: RACE (rýchla amplifikácia koncov cDNA) sa používa na amplifikáciu kratších úsekov od oboch koncov cDNA, ak je známa časť sekvencie cDNA. Táto metóda sa delí na 5’-RACE a 3’-RACE. Pre použitie RACE je nevyhnutná znalosť časti sekvencie vo vnútri molekuly mRNA. 3’-RACE využíva prítomnosť prirodzeného poly(A)-konca na mRNA, zatiaľ čo 5’-RACE využíva genovo špecifický primer SP1 a reverznú transkriptázu, a následne sa k amplikónom pripojí 3’-poly(dA).

Otázka 3: Počas alkalickej denaturácie dochádza k nenávratnému oddeleniu reťazcov plazmidovej DNA, čo znemožňuje jej následnú renaturáciu.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: Pri alkalickej denaturácii plazmidová DNA, na rozdiel od chromozómovej DNA, zostáva v nadšróbovicovej forme, alebo ak aj dôjde k oddeleniu reťazcov, pri následnom znížení pH „renaturuje“ a obnovia sa vodíkové väzby. K oddeleniu reťazcov nedochádza trvalo.

Otázka 4: Ktoré tvrdenie najlepšie opisuje princíp gélovej chromatografie pri purifikácii nukleových kyselín podľa poskytnutého textu?

A. Malé molekuly, ako soli a nukleotidy, prechádzajú kolónou rýchlejšie ako veľké molekuly nukleových kyselín.

B. Veľké molekuly nukleových kyselín prechádzajú kolónou rýchlejšie, pretože neprenikajú zrnkami matrice, zatiaľ čo malé molekuly sa spomaľujú.

C. Všetky molekuly prechádzajú kolónou rovnakou rýchlosťou, pričom separácia prebieha na základe ich náboja.

D. Separácia molekúl je založená na ich denaturácii a následnom vyzrážaní v kolóne.

Vysvetlenie: Podľa textu, gélová chromatografia využíva náplň z malých zrniek nosiča. Veľké molekuly nukleových kyselín zrnkami matrice neprestupujú a prechádzajú kolónou rýchlejšie, zatiaľ čo malé molekuly, ako soli a nukleotidy, prechádzajú kolónou a spomaľujú svoj pohyb.

Otázka 5: V procese prípravy cDNA sa vlákno mRNA odbúra pôsobením enzýmu RNázy H.

A. Áno

B. Nie

Vysvetlenie: Podľa študijných materiálov sa vlákno mRNA v procese prípravy cDNA odbúra pomocou NaOH, nie enzýmu RNázy H.