Test na Biochemické a analytické techniky

Otázka 1: V analytickom použití afinitnej chromatografie sa sleduje afinitná interakcia.

A. Ano

B. Ne

Vysvetlenie: Afinitná chromatografia má analytické použitie, pri ktorom sa sleduje afinitná interakcia. Toto je možné dosiahnuť napríklad pridávaním voľnej frakcie ligandu do vzorky alebo frontálnym nanášaním vzorky, čo umožňuje vypočítať počet väzbových miest a disociačnú konštantu.

Otázka 2: Ktoré tvrdenie najlepšie opisuje základný princíp reverzne fázovej chromatografie (RPC) podľa dodaných študijných materiálov?

A. Využíva najslabšie nepolárne sily medzi analytom a nepolárnou stacionárnou fázou, pričom mobilná fáza je polárna.

B. Je založená na špecifickej a reverzibilnej interakcii ligandu imobilizovaného na stacionárnej fáze s biomakromolekulou.

C. Princíp spočíva v tom, že veľké molekuly sa priklápajú a vytvárajú kvapôčku v organickej fáze, čo je rozdeľovací princíp.

D. Elúcia sa vykonáva zvyšovaním iónovej sily mobilnej fázy a bielkoviny zostávajú v natívnom stave.

Vysvetlenie: Reverzne fázová chromatografia (RPC) podľa materiálov využíva najslabšie interakcie pri látkach, ktoré nie sú permanentné dipóly (nepolárne sily), s polárnou mobilnou fázou a nepolárnou stacionárnou fázou. Voľba 0 je správna, pretože presne opisuje tieto charakteristiky. Voľba 1 je nesprávna, pretože princíp špecifickej interakcie ligandu je typický pre afinitnú chromatografiu (AC). Voľba 2 čiastočne opisuje aspekt pre malé molekuly, ale nie celkový základný princíp, a nie je formulovaná ako najlepšie vysvetlenie základného princípu. Voľba 3 je nesprávna, pretože elúcia zvyšovaním iónovej sily a zachovanie natívneho stavu bielkovín je typické pre hydrofóbnu interakčnú chromatografiu (HIC) alebo nešpecifickú elúciu v AC, zatiaľ čo RPC elúcia prebieha znižovaním polarity mobilnej fázy a bielkoviny denaturuje.

Otázka 3: Pri izotachoforéze sa vzorka iónov vkladá medzi vodiaci elektrolyt a elektródu s najvyššou elektroforetickou mobilitou, pričom koncový elektrolyt je ión s najvyššou mobilitou, ktorý uzatvára systém.

A. Ano

B. Ne

Vysvetlenie: Pri izotachoforéze sa vzorka (katióny) vkladá medzi vodiace elektródy. Vodiaci (leading) elektrolyt je ión s najvyššou elektroforetickou mobilitou a terminátor (koncový elektrolyt) je ión s najnižšou elektroforetickou mobilitou, ktorý uzatvára systém.

Otázka 4: Ktoré tvrdenia správne popisujú micelárnu elektrokinetickú chromatografiu (MEKC)?

A. Do základného elektrolytu sa pridáva detergent (SDS) v koncentrácii vyššej ako kritická micelárna koncentrácia, pričom vznikajú kladne nabité micely.

B. Separácia neutrálnych (nenabitých) látok je založená na tom, že čím je analyt hydrofóbnejší, tým dlhšie zostane v micele a putuje pomalšie.

C. Analyt sa distribuuje medzi vodnú fázu (pufor) a hydrofóbne jadro micely na základe svojej vlastnej polarity.

D. Micely sú stabilné, stacionárne fázy, ktoré sa v elektrickom poli nepohybujú.

Vysvetlenie: V MEKC sa pridáva detergent (SDS) s koncentráciou vyššou než je kritická micelárna koncentrácia, pričom vznikajú záporne nabité micely, nie kladne, čo robí prvú možnosť nesprávnou. Analyt sa distribuuje medzi vodnú fázu a hydrofóbne jadro micely na základe svojej polarity. Separácia neutrálnych látok prebieha tak, že čím je analyt hydrofóbnejší, tým dlhšie zostane v micele a putuje pomalšie. Micely sú pohyblivé a predstavujú pseudostacionárnu fázu, ktorá putuje proti smeru EOF, nie sú stabilné a stacionárne.

Otázka 5: V procese semi-dry blottingu sa priamo na spodnú elektródu najprv umiestni gél, potom membrána a následne filtračné papiere.

A. Ano

B. Ne

Vysvetlenie: Podľa študijných materiálov sa pri semi-dry blottingu priamo na spodnú elektródu najprv naskladajú filtračné papiere, na ne membrána, potom gél a až nakoniec ďalšie filtračné papiere, pred uzavretím druhou elektródou.