Resumen de Prueba de Hudlesson: Diagnóstico de Brucelosis
Prueba de Hudlesson: Diagnóstico de Brucelosis – Guía Completa
Introducción
La prueba de Hudlesson (aglutinación en lámina para Brucella) es una técnica rápida de cribado para detectar anticuerpos dirigidos contra Brucella en suero humano o animal. Es una prueba cualitativa y semicuantitativa que complementa a la prueba en tubo y ayuda en el diagnóstico de brucelosis cuando se combinan resultados clínicos y epidemiológicos.
Definición: La prueba de Hudlesson es una aglutinación en lámina que detecta anticuerpos anti-Brucella (IgM e IgG) mediante la mezcla de suero diluido con antígeno de Brucella y observación de aglutinación.
Materiales y preparación
Material esencial
- Campo de trabajo
- Bocal con lejía
- Lámina de vidrio con pozos para aglutinación
- Pipetas serológicas de 0,2 mL con propipeta o micropipeta y puntas
- Suero problema
- Controles: control positivo y control negativo
- Antígeno: Brucella abortus cepa 1119-3 (10–12%)
- Mondadientes o mezcladores
Procedimiento previo: Antes de iniciar se debe verificar el EPP: mandil, cabello recogido, zapatos cerrados y guantes si se solicitan.
Organización de la mesa
- Colocar la lámina al centro.
- Reactivos a un lado y pipetas cerca de la lámina.
- Mantener postura cómoda y estable.
Etiquetado y control de muestras
- Rotular la lámina indicando: suero problema, control positivo, control negativo.
- Recordatorio práctico: primero rotular, luego pipetear.
Técnica de pipeteo y volúmenes
- Usar tips adecuados y colocarlos firmemente.
- Mantener la pipeta vertical al aspirar.
- Cambiar punta cuando corresponda y evitar tocar superficies.
Volúmenes a depositar en la lámina: 80 μL, 40 μL, 20 μL, 10 μL, 5 μL.
Práctica: memorizar la secuencia: "80 – 40 – 20 – 10 – 5" y depositar en los pozos rotulados.
Preparación del antígeno y adición
- Homogeneizar el antígeno antes de usar: vaciar el gotero y mezclar el frasco por inversión varias veces.
- Mantener el gotero vertical al dispensar una gota en cada pozo con muestra.
- Verificar que cada pozo reciba la misma cantidad.
Consejo: No usar el antígeno directamente sin mezclar; comprobar la uniformidad visual del líquido.
Mezclado y orden
- Mezclar con palillos o mezcladores.
- Si se usa un solo palillo, emplear el orden: de mayor dilución a menor dilución.
- Recuerdo fácil: "Voy de mayor a menor dilución."
Incubación y rotación
- Llevar la lámina al rotador inmediatamente después de mezclar.
- Verificar que el rotador funcione correctamente.
- Tiempo de rotación: mantener la lámina en el rotador durante 4 minutos.
Lectura de la prueba
- Retirar la lámina y leer con lámpara o aglutinoscopio.
- Observar detenidamente cada reacción.
Criterios de lectura
| Resultado | Descripción | Interpretación práctica |
|---|---|---|
| Positivo | Grumos finos o grandes rodeados de líquido transparente | Agregación visible; reportar título según máxima dilución con reacción completa |
| Negativo | Mezcla homogénea sin aglutinación | Sin anticuerpos detectables por esta técnica |
- El título se expresa como la inversa de la máxima dilución con reacción completa.
- Título diagnóstico positivo: $200$ o más.
Definición: Título → inversa de la máxima dilución del suero que produce aglutinación completa.
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Hudlesson - Brucelosis
Klíčová slova: Prueba Hudlesson (Brucelosis)
Klíčové pojmy: Verificar EPP al ingresar al laboratorio, Rotular la lámina antes de pipetear, Depositar volúmenes: 80 μL, 40 μL, 20 μL, 10 μL, 5 μL, Homogeneizar el antígeno por inversión antes de usar, Dispensar antígeno con el gotero vertical, Mezclar de mayor a menor dilución si se usa un solo palillo, Rotar la lámina exactamente 4 minutos, Leer con lámpara o aglutinoscopio y buscar grumos rodeados de líquido claro, Título = inversa de la máxima dilución con reacción completa, Título diagnóstico positivo: $200$ o más, Usar controles positivo y negativo en cada corrida, Interpretar siempre con contexto clínico y epidemiológico