Resumen de Prueba de Hudlesson: Diagnóstico de Brucelosis

## Introducción La prueba de Hudlesson (aglutinación en lámina para Brucella) es una técnica rápida de cribado para detectar anticuerpos dirigidos contra Brucella en suero humano o animal. Es una prueba cualitativa y semicuantitativa que complementa a la prueba en tubo y ayuda en el diagnóstico de brucelosis cuando se combinan resultados clínicos y epidemiológicos. > Definición: La prueba de Hudlesson es una aglutinación en lámina que detecta anticuerpos anti-Brucella (IgM e IgG) mediante la mezcla de suero diluido con antígeno de Brucella y observación de aglutinación. ## Materiales y preparación ### Material esencial - Campo de trabajo - Bocal con lejía - Lámina de vidrio con pozos para aglutinación - Pipetas serológicas de 0,2 mL con propipeta o micropipeta y puntas - Suero problema - Controles: control positivo y control negativo - Antígeno: Brucella abortus cepa 1119-3 (10–12%) - Mondadientes o mezcladores > Procedimiento previo: Antes de iniciar se debe verificar el EPP: mandil, cabello recogido, zapatos cerrados y guantes si se solicitan. ### Organización de la mesa 1. Colocar la lámina al centro. 2. Reactivos a un lado y pipetas cerca de la lámina. 3. Mantener postura cómoda y estable. ## Etiquetado y control de muestras - Rotular la lámina indicando: suero problema, control positivo, control negativo. - Recordatorio práctico: primero rotular, luego pipetear. ## Técnica de pipeteo y volúmenes - Usar tips adecuados y colocarlos firmemente. - Mantener la pipeta vertical al aspirar. - Cambiar punta cuando corresponda y evitar tocar superficies. > Volúmenes a depositar en la lámina: 80 μL, 40 μL, 20 μL, 10 μL, 5 μL. Práctica: memorizar la secuencia: "80 – 40 – 20 – 10 – 5" y depositar en los pozos rotulados. ## Preparación del antígeno y adición - Homogeneizar el antígeno antes de usar: vaciar el gotero y mezclar el frasco por inversión varias veces. - Mantener el gotero vertical al dispensar una gota en cada pozo con muestra. - Verificar que cada pozo reciba la misma cantidad. > Consejo: No usar el antígeno directamente sin mezclar; comprobar la uniformidad visual del líquido. ## Mezclado y orden - Mezclar con palillos o mezcladores. - Si se usa un solo palillo, emplear el orden: de mayor dilución a menor dilución. - Recuerdo fácil: "Voy de mayor a menor dilución." ## Incubación y rotación - Llevar la lámina al rotador inmediatamente después de mezclar. - Verificar que el rotador funcione correctamente. - Tiempo de rotación: mantener la lámina en el rotador durante **4 minutos**. ## Lectura de la prueba - Retirar la lámina y leer con lámpara o aglutinoscopio. - Observar detenidamente cada reacción. ### Criterios de lectura | Resultado | Descripción | Interpretación práctica | |---|---:|---| | Positivo | Grumos finos o grandes rodeados de líquido transparente | Agregación visible; reportar título según máxima dilución con reacción completa | | Negativo | Mezcla homogénea sin aglutinación | Sin anticuerpos detectables por esta técnica | - El título se expresa como la inversa de la máxima dilución con reacción completa. - Título diagnóstico positivo: $200$ o más. > Definición: Título → inversa de la máxima dilución del suero que produce aglutinación completa.