Resumen de Morfología Celular y Experimentos Clave

## Introducción La microbiología y las técnicas de laboratorio de biología celular incluyen métodos para observar, identificar y manipular células y sus orgánulos mediante preparaciones microscópicas, coloraciones y procedimientos de cultivo. Este material resume prácticas comunes: cortes histológicos, frotis sanguíneos, observación de orgánulos vegetales, cromatografía de pigmentos y preparación de cultivos celulares para análisis citogenético. > Definición: La biología celular experimental es el conjunto de técnicas y procedimientos de laboratorio destinados a visualizar y analizar la estructura, función y dinámica de células y orgánulos. ## Preparaciones y observaciones microscópicas: tipos y objetivos ### 1. Cortes histológicos y tejidos - Objetivo: observar arquitectura tisular y orgánulos (p. ej. hepatocitos, fibras musculares). - Ejemplos del contenido: - Corte de hígado de rata: hepatocitos binucleados con nucléolos prominentes. - Corte de músculo esquelético de rata: fibras estriadas y células polinucleadas. > Definición: Corte histológico es una sección delgada de tejido fijado y teñido para su observación al microscopio óptico. Procedimiento general: 1. Fijación (p. ej. formalina) para conservar estructura. 2. Inclusión en parafina y corte con microtomo. 3. Montaje en porta y tinción (hematoxilina-eosina u otras específicas). ### 2. Frotis de sangre - Objetivo: evaluar morfología de eritrocitos y leucocitos. - Preparaciones mencionadas: - Frotis de sangre humana: observar glóbulos rojos (anucleados), glóbulos blancos (formas nucleares diversas). - Frotis de sangre de sapo: comparar morfología y tinciones con sangre humana (anfibios suelen tener eritrocitos nucleados). Técnica rápida: - Extender gota de sangre en porta, secar al aire, fijar (metanol) y teñir (Giemsa o Wright). Fun fact: ¿Sabías que los eritrocitos humanos pierden su núcleo durante la maduración en la médula ósea para maximizar el espacio funcional para la hemoglobina y facilitar el paso por capilares estrechos? ### 3. Preparaciones de órganos y ápices de raíz (mitosis) - Corte longitudinal de ápice de raíz de cebolla (Allium cepa): tinción con hematoxilina para visualizar células en interfase y las diferentes fases de mitosis. - Aplastado de ápice de raíz de haba (Vicia faba): tinción con fucsina para observar interfase y etapas mitóticas. Procedimiento clave: 1. Recolección de ápices, prefijación si es necesario. 2. Fijación, hidrólisis leve si requiere sacar cromatina. 3. Tinción (hematoxilina, fucsina), montaje y observación. ### 4. Suspensión de linfocitos en cultivo para cariotipos - Objetivo: obtener metafases y cromosomas para análisis citogenético. - Protocolo resumido (según contenido): 1. Cultivar sangre periférica 72 h a 37 °C con mitógeno para estimular división de linfoblastos. 2. Añadir colchicina durante las 2 h finales para detener mitosis en metafase. 3. Tratamiento hipotónico para hinchar células y dispersar cromosomas. 4. Fijación con metanol-acético y extensión en porta. 5. Tinción con Giemsa y observación de núcleos interfásicos y metafásicos. > Definición: Colchicina es un agente que inhibe la polimerización de microtúbulos, deteniendo las células en metafase y facilitando la visualización cromosómica. ## Observación de orgánulos vegetales y exclusión de colorantes ### 1. Ejemplos y qué observar - Corte de Spirogyra (alga filamentosa): cloroplastos en forma de cinta (espirales típicos). - Amiloplastos en tubérculos de papa: observar gránulos de almidón; contraste con y sin lugol para confirmar la presencia de almidón. - Células vegetales (elodea, cebolla): respuesta a medios hipotónicos (turgencia) y a medios hipertónicos (plasmólisis). Técnica de extracción de amiloplastos: - Raspado de tejido con espátula, montaje directo y tinción con lugol para evidenciar almidón (oscurecimiento azul/negro). ### 2. Exclusión de azul de tripán - Propósito: distinguir células vivas de muertas (azul penetra cél