Laboratorní biochemie - Preanalytika a zpracování
Klíčová slova: Laboratorní biochemie, Odběr krve, Statistika, Interpretace výsledků
Klíčové pojmy: Preanalytická fáze zahrnuje biologické vlivy, manipulaci a skladování vzorku, Neovlivnitelné vlivy: rasa, pohlaví, věk, gravidita, biorytmy, Ovlivnitelné vlivy: hmotnost, cvičení, dieta, kouření, alkohol, léky, stres, Hemodiluce v těhotenství snižuje koncentrace proteinů a hemoglobinu, Plazma vzniká z nesrážlivé krve s antikoagulancii, sérum po srážení, Fluoridy inhibují enolázu a zabraňují glykolýze v erytrocytech, Centrifugace: $1000$–$2000$ ot./min, $5$–$15$ minut, pokojová teplota nebo $4\,^{\circ}\mathrm{C}$, Hemolýza uvolní K^{+}, hemoglobin a LD a může zkreslit výsledky, Chylózní vzorek signalizuje vysoké TG nebo nedodržení lačnění, Vzorky pro delší uchování mrazit a chránit před světlem, Buffy coat obsahuje leukocyty a trombocyty (~1 % objemu), Před plánovaným odběrem se vyvarovat intenzivní fyzické aktivity a tučných jídel pro lipidy
## Úvod
Laboratorní biochemie zkoumá složení biologických materiálů a faktory, které ovlivňují výsledky vyšetření. Tento materiál se zaměřuje především na preanalytické vlivy, zpracování krve a praktické dopady těchto procesů. Cílem je vysvětlit, jak různé biologické a technické faktory mění výsledky biochemických testů a jak se vzorky správně zpracovávají pro spolehlivé měření.
> Definice: Preanalytická fáze jsou všechny kroky před samotným měřením analytu, které mohou ovlivnit výsledek (příprava pacienta, manipulace se vzorkem, transport, skladování).
## Struktura laboratorního vyšetření
1. **Preanalytická fáze** (připravená definice výše) — zahrnuje biologické vlivy, způsob odběru, transport a uchování vzorku. (Poznámka: podrobnosti o samotném odběru jsou pokryty jinde.)
2. **Analytická fáze** — samotné měření a výpočty výsledku.
3. **Postanalytická fáze** — interpretace výsledku lékařem. (Interpretace výsledků zde není zahrnuta, viz instrukce.)
## Biologické vlivy ovlivňující výsledky (preanalytika)
Biologické vlivy dělíme na neovlivnitelné a ovlivnitelné. Každá skupina má konkrétní příklady a mechanismy, jak mění koncentrace analytů.
### Neovlivnitelné biologické vlivy
- **Rasa a etnický původ**
- Různé rasy mohou mít odlišnou svalovou hmotu a metabolismus; některé choroby jsou spojeny s určitým etnikem.
- Příklad: u osob s tmavší pletí může být zvýšená aktivita kreatinkinázy; u Asiatů zvýšená aktivita slinné amylázy; Von Gierkeho choroba častější u aškenázských židů.
- **Pohlaví**
- U žen bývají fyziologické hodnoty některých parametrů mírně nižší (např. erytrocyty, hematokrit, CK).
- **Věk**
- Děti mají odlišné referenční meze; např. aktivita ALP je během růstu vysoká a po dokončení růstu klesá.
- Některé parametry (např. glomerulární filtrace) se u dětí korigují.
- **Gravidita**
- Placenta uvolňuje hormony (progesteron, hCG, placentární laktogen) a mění objem tekutin — výsledkem je hemodiluce.
- Typické změny: pokles koncentrace celkových proteinů a hemoglobinu, zvýšená aktivita placentární ALP, inzulinová rezistence ve 2. trimestru, hyperlipidemie zejména v 3. trimestru.
- **Biorytmy**
- Cyklické změny ovlivňují např. kortisol (nejvyšší ráno), vitamin D (sezonní), CK (vyšší večer po námaze).
> Definice: Hemodiluce je snížení koncentrace krevních složek vlivem zvýšení objemu plazmy.
### Ovlivnitelné biologické vlivy
- **Hmotnost (obezita)**
- Změna distribučních objemů, časté zvýšení LDL, triglyceridů (TG) a kyseliny močové; častý vznik inzulinové rezistence a DM II.
- **Fyzická aktivita**
- Bezprostředně po námaze stoupají CK, ALT, AST, LD, kreatinin, fosfát vlivem zvýšené permeability svalových buněk.
- Delší anaerobní práce zvyšuje laktát; dehydratace zvyšuje koncentraci celkových proteinů a hematokritu.
- Doporučení: vyvarovat se náročné fyzické aktivity před odběrem (výjimkou jsou testy výkonnosti jako stanovení laktátu).
- **Dieta / hladovění**
- Jídlo přímo mění koncentrace např. glykemie po jídle stoupá; vysoký příjem masa zvyšuje močovinu, kyselinu močovou a může snižovat pH.
- Vegetariánská strava obvykle snižuje LDL a TG; dlouhodobě může snížit B12 a železo, zvýšit homocystein.
- **Dehydratace**
- Zvyšuje koncentrace mnoha látek vlivem snížení objemu intravaskulární tekutiny.
- **Kouření**
- Zvyšuje cholesterol, TG, fibrinogen a karbonylhemoglobin (vliv CO na hemoglobin).
- **Alkohol**
- Chronický alkoholismus poškozuje játra -> zvýšení jaterních enzymů, typicky poměr AST/ALT > 2; ovlivňuje glykemii a zvyšuje TG.
- **Léky**
- Mohou inhibovat enzymy, měnit metabolismus, působit cytotoxicky a významně ovlivnit výsledky.
- **Stres**
- Vyplavení hormonů mění metabolismus (např. glukózy).
- **Zevní prostředí**
- Teplota, nadmořská výška a lokalita bydliště mohou měnit některé hodnoty.
- **Mechanické vlivy**
- Trauma svalů způsobuje zvýšení svalových enzymů (ALT, AST, CK).
## Zpracování krve (získání plazmy nebo séra)
> Definice: Sérum je tekutina získaná po koagula