Analýza mozkomíšního moku: Komplexní průvodce pro studenty

TL;DR: Analýza mozkomíšního moku (likvoru) je klíčová diagnostická metoda v neurologii, která umožňuje odhalit záněty, krvácení, demyelinizační onemocnění jako roztroušená skleróza a poruchy bariér. Vyšetřují se buňky, bílkoviny, glukóza, laktát a další markery, často pomocí spektrofotometrie a izoelektrické fokusace. Správný odběr a rychlé zpracování vzorku jsou zásadní pro přesné výsledky.

Co je mozkomíšní mok (likvor) a proč se analyzuje? (Analýza mozkomíšního moku shrnutí)

Mozkomíšní mok, neboli likvor, je čirá tekutina, která obklopuje mozek a míchu, chrání je a zajišťuje transport živin a odpadních látek. Jeho celkové množství v lidském těle se pohybuje mezi 120 a 180 ml. Analýza likvoru je nenahraditelná pro diagnostiku široké škály neurologických onemocnění.

Vyšetření likvoru poskytuje cenné informace o procesech probíhajících v centrálním nervovém systému, které nemusí být zjevné při jiných vyšetřeních. Jedná se o invazivní, ale velmi důležitou diagnostickou metodu.

Jak probíhá analýza mozkomíšního moku: Přehled laboratorních metod (Analýza mozkomíšního moku rozbor)

Pro správnou a spolehlivou diagnostiku je nezbytný pečlivý odběr a rychlé zpracování vzorku likvoru. Některé parametry, jako je počet buněk, je nutné stanovit do 2 hodin od odběru.

Fyzikální a makroskopické vlastnosti likvoru

Po odběru se likvor nejprve makroskopicky posoudí. Fyziologicky je likvor čirý a bezbarvý.

• U hnisavé meningitidy je likvor typicky opalescentní nebo zakalený.
• U arteficiálního krvácení (způsobeného odběrem) je likvor po centrifugaci čirý a bezbarvý.
• U krvácení do likvorových cest je likvor po centrifugaci xantochromní (žlutě zbarvený).

Vyšetření celkové bílkoviny v likvoru

Stanovení celkové bílkoviny je základním testem. Její horní fyziologická mez je 0,5 g/l.

• Celková bílkovina se stanovuje turbidimetricky s benzethoniumchloridem.
• Pandyho reakce slouží k průkazu bílkovin a je založena na srážení bílkovin nasyceným roztokem fenolu.
• Zvýšená celková bílkovina se vyskytuje například u roztroušené sklerózy a při poruše hemato-likvorové bariéry.
• Bílkovina může být snížená pod překážkou (např. při míšním bloku).

Glukóza a laktát: Energetická bilance likvoru

Tyto metabolity poskytují důležité informace o energetickém stavu centrálního nervového systému a přítomnosti infekce.

• Koncentrace glukózy v likvoru je přímo úměrná glykémii.
• Enzymy používané pro stanovení glukózy jsou hexokináza a glukózooxidáza.
• Norma laktátu v likvoru je 1 – 2 mmol/l.
• Pro stanovení laktátu se používá laktátoxidáza (krok 1) a peroxidáza (krok 2).
• Koncentrace laktátu v likvoru je prakticky vždy zvýšená u hnisavých zánětů.
• Energetická bilance v likvoru se vyjadřuje vzorcem, do kterého se dosazuje laktát a glukóza.

Cytologické vyšetření likvoru: Počítání buněk

Vyšetření buněk v likvoru je klíčové pro diagnostiku zánětlivých stavů.

• Buňky v likvoru se počítají ve Fuchs-Rosenthalově komůrce.
• Centrifugační rychlost při cytologii likvoru je 1000 g.
• Počet buněk v likvoru je fyziologicky <5/μl.
• Pleocytóza znamená zvýšený počet buněk.
• Lymfocytární pleocytóza je typický obraz nehnisavého zánětu (např. virové meningitidy).
• Plazmatické buňky se často vyskytují v likvoru pacientů s roztroušenou mozkomíšní sklerózou.
• U subarachnoidálního krvácení je v cytologii průkaz hemosiderinu (indikuje starší krvácení).

Spektrofotometrie likvoru: Odhalení krvácení

Spektrofotometrie je citlivá metoda pro detekci krvácení do likvorových cest.

• Na ose x grafického záznamu spektrofotometrie likvoru je vlnová délka a na ose y absorbance.
• Slouží k odhalení krvácení do likvorových cest.
• Oxyhemoglobin má absorpční maximum při 415 nm. Zvýšený oxyhemoglobin značí čerstvé krvácení.
• Bilirubin má absorpční maximum při 430 – 460 nm. Zvýšený bilirubin značí starší krvácení.
• Methemoglobin je také diagnostickým nálezem u subarachnoidálního krvácení.

Izoelektrická fokusace: Klíč k intratékální syntéze IgG

Izoelektrická fokusace (IEF) je nejcitlivější metoda pro průkaz intratékální syntézy imunoglobulinů.

• IEF detekuje oligoklonální pásy ve třídě IgG.
• Oligoklonální IgG pásy v likvoru a séru se vyšetřují právě izoelektrickou fokusací.
• Reiberovy grafy slouží ke zjištění intratékální syntézy imunoglobulinů.
• Klasifikace nálezu izoelektrické fokusace (konsenzuální klasifikace):
• Typ 1: Označuje fyziologický nález.
• Typ 3: Znamená přítomnost oligoklonálních IgG pásů v likvoru i v séru, ale v likvoru ve vyšším počtu než v séru.
• Typ 4: Označuje přítomnost oligoklonálních pásů v likvoru i v séru ve shodných pozicích a intenzitách.
• Typ 5: Označuje přítomnost paraproteinu v likvoru i v séru.

Další významné markery a reakce

• Stanovení chloridového aniontu v likvoru je obsoletní.
• Beta-trace protein slouží k diagnostice likvorhey (úniku likvoru).
• PCR průkaz DNA se používá u herpetické encefalitidy.

Klinické nálezy při analýze mozkomíšního moku: Co indikuje patologii? (Analýza mozkomíšního moku maturita)

Diagnostika zánětů mozku a míchy

Analýza likvoru je zásadní pro rozlišení bakteriálních a virových zánětů.

• U virové meningitidy nacházíme v likvoru zpravidla pleocytózu s převahou lymfocytů.
• U nehnisavé meningitidy nacházíme zvýšený počet buněk (lymfocytární pleocytóza).
• U hnisavé meningitidy je likvor typicky opalescentní nebo zakalený a je zde prakticky vždy zvýšená koncentrace laktátu.

Diagnostika krvácení

Krvácení do subarachnoidálního prostoru nebo likvorových cest je závažný stav.

• Při podezření na subarachnoidální krvácení se likvor vyšetřuje při negativním CT nálezu (pokud CT krvácení neprokáže, ale klinické příznaky přetrvávají).
• Diagnostický nález u subarachnoidálního krvácení zahrnuje methemoglobin, zvýšený bilirubin ve spektrofotometrické křivce a zvýšenou celkovou bílkovinu.
• V cytologii je u subarachnoidálního krvácení průkaz hemosiderinu, který svědčí pro starší krvácení.

Roztroušená skleróza a další neurologické onemocnění

Analýza likvoru hraje klíčovou roli i u demyelinizačních onemocnění.

• U roztroušené mozkomíšní sklerózy je celková bílkovina v likvoru zvýšená a často se vyskytují plazmatické buňky.
• K průkazu intratékální syntézy IgG, typické pro roztroušenou sklerózu, se používá izoelektrická fokusace.

Hematoencefalická a hemato-likvorová bariéra

Bariéry oddělující krev od mozku a likvoru jsou životně důležité pro udržení homeostázy centrálního nervového systému.

• Hemato-encefalická bariéra se nachází mezi krví a mozkem.
• Funkce hematoencefalické bariéry je vyjádřena kvocientem albuminu.
• Albuminový kvocient je poměr koncentrace albuminu v likvoru ke koncentraci albuminu v séru.
• Porucha hemato-likvorové bariéry vede ke zvýšené celkové bílkovině v likvoru.

Bezpečnost a správný odběr

Likvorhea (únik likvoru) ohrožuje nemocného možností zanesení infekce do likvorových cest. Proto je precizní provedení odběru a monitorování pacienta po zákroku nezbytné.

Často kladené otázky k analýze mozkomíšního moku (FAQ)

Jak se vyšetřuje intratékální syntéza imunoglobulinů?

Intratékální syntéza imunoglobulinů se nejcitlivěji detekuje izoelektrickou fokusací (IEF), která dokáže odhalit oligoklonální IgG pásy přímo v likvoru. Doplňkově se používají Reiberovy grafy.

Co indikuje xantochromní likvor po centrifugaci?

Xantochromní likvor po centrifugaci je diagnostickým nálezem krvácení do likvorových cest, tedy staršího krvácení, které vedlo k rozpadu hemoglobinu a tvorbě bilirubinu.

Kdy je nutné stanovit počet buněk v likvoru?

Počet buněk v likvoru je třeba stanovit do 2 hodin od odběru, aby se zabránilo jejich rozpadu a získaly se co nejpřesnější výsledky, důležité pro diagnostiku zánětů.

Jaké jsou normální hodnoty laktátu v likvoru?

Norma laktátu v likvoru se pohybuje v rozmezí 1 – 2 mmol/l. Zvýšené hodnoty jsou silným indikátorem hnisavých zánětů.

Co je Pandyho reakce a k čemu slouží?

Pandyho reakce je starší kvalitativní test, který slouží k orientačnímu průkazu zvýšeného množství bílkovin v likvoru. Její princip spočívá ve srážení bílkovin nasyceným roztokem fenolu, což vede k zákalu.